Kvalitativna analiza za hepatitis C

Ostavite komentar 9.080

Kvalitativna analiza lančane reakcije polimeraze - PCR za hepatitis C određuje prisutnost ili odsutnost HCV u tijelu. U laboratorijskim uvjetima proučava se struktura RNA koja će uključivati ​​virus. U slučaju otkrivanja virusa C, potrebno je podvrgnuti tijeku liječenja, jer će zanemareno stanje jetre rezultirati teškim posljedicama. Vrlo kvalitetno PCR se također provodi nakon oporavka kako bi se potvrdilo odsutnost protutijela. Dodijeljeno za rutinsku inspekciju. Uz nisku koncentraciju uzročnika u krvi, PCR (kvalitativno) ne smije otkriti ništa, jer dijagnostički sustav ima vlastite pragove osjetljivosti. U slučaju početne faze bolesti ili blage forme, PCR ultra dijagnostika obavlja se na ultra osjetljivoj opremi.

Što je RNA virus?

Pojam RNA virusa hepatitisa C (ili hepatitis C virus RNA) je same bolesti jetre. Virus C veže se na zdrave stanice tijela penetrirajući unutra. Tijekom vremena, širenje po tijelu, potrebno je samo ulazeći u krv. Kao rezultat, patogen prodire u jetru, osigurava svoje stanice i naporno radi. Hepatici (hepatociti) rade pod njegovim utjecajem, prolazeći promjenama, a od toga umiru. Što duže virus C bude u jetri, to je veći broj stanica umrijeti. Tijekom vremena razvijte opasne bolesti koje dovode do maligne degeneracije i smrti.

Infekcija jetre s ovom vrstom virusa se ne može manifestirati izvana. Dugi niz godina ili desetljeća zaražena osoba osjeća se potpuno zdravo, a samo slučajni pregled najčešće otkriva patologiju. Kada se donosi krv za hepatitis, ispituje se dio lanca RNA (ribonukleinske kiseline), koji je dio ljudskog gena (DNA). Rezultati laboratorijskih testova ne bi trebali biti korišteni za samo-liječenje, jer je to samo pokazatelj. Točnu sliku i daljnju dijagnozu bolje određuje liječnik.

Kada završite: indikacije za istraživanje

U potvrdi HCV provodi se PCR analiza (lančana reakcija polimeraze). Studije PCR-a pomažu u otkrivanju patogenog materijala u strukturi RNA i propisivanju učinkovite terapije. Imenovan u sljedećim slučajevima:

  • otkrivanje znakova upale jetre;
  • probira za prevenciju;
  • ispitivanje osoba u kontaktu;
  • dijagnoza hepatitisa mješovitog porijekla (određivanje glavnog patogena);
  • određivanje razine reprodukcijske aktivnosti virusa u kroničnom obliku;
  • ciroza jetre;
  • kako bi se odredila učinkovitost propisane terapije.
Studije o PCR-u propisane su od strane liječnika kako bi se utvrdilo učinkovitost liječenja hepatitisa.

Postoji kvalitativna i kvantitativna analiza PCR-a. Kvantitativno PCR pokazuje postotni omjer RNA na prijenosnike virusa u krvi, a kvalitativno ukazuje na virusnu prisutnost ili odsutnost. Pozitivan pokazatelj kvalitete (prisutnost Hepatitis C RNA) također treba kvantitativno istraživanje. Visoka koncentracija uzročnika hepatitisa C povezana je s rizikom njegovog prijenosa, tj. Infekcijom drugih. Manje vrijednosti su bolje liječene. Količina RNA virusa u krvi nije povezana s intenzitetom bolesti. PCR analiza se također obavlja u slučaju interferonske terapije kako bi se propisala trajanje i složenost liječenja.

Značajke visoke kvalitete PCR analize za hepatitis C

Kvalitativna analiza s indeksom lančane reakcije polimeraze dodijeljena je svim pacijentima koji imaju protutijela na hepatitis C u njihovoj krvi. Oni koji su bili bolesni i oporavljeni moraju ponovno uzeti test. Preporuča se proći test za hepatitis B, zatim, u slučaju pozitivnog zaključka, i za hepatitis D. Također, kvalitativno analizirana reakcija treba provesti u kombinaciji s drugim krvnim testovima. Analize će pokazati potpunu sliku širenja virusa.

Iz rezultata ispitivanja, samo pozitivan test za hepatitis C bit će vidljiv ili negativan, to jest prisutnost ili odsutnost virusa. Ako je izlaz "detektiran", virus je i nastavlja biti aktivan. Oznaka "nije otkrivena" ukazuje na odsutnost virusa ili malu količinu virusa. Uz ovaj pokazatelj, treba imati na umu da je analitička osjetljivost dijagnostičkih sustava različita i da RNA hepatitis C još uvijek može biti u krvi, ali se ne očituje u analizi.

Posebno osjetljiva PCR metoda ultra hepatitis C otkriva čak iu malim količinama. Koristi se fluorescentna hibridizacijska studija, koja je mnogo puta veća od standardnih PCR sustava. Metoda se koristi u nekoliko slučajeva:

  • sumnja na skrivene oblike hepatitisa C;
  • PCR dijagnostika nije potvrdila patogena, ali postoje antitijela;
  • u slučaju oporavka;
  • za otkrivanje rane infekcije.
Natrag na sadržaj

Analiza dekodiranja

PCR dekodiranje HCV utječe na konačnu odluku prilikom dijagnosticiranja, posebice, metodom ultrametoda. Glavni nedostatak ove studije je strogo pridržavanje sterilnih uvjeta za uzorak i materijale. Lagano odstupanje ponekad pokazuje netočne analitičke zaključke, komplicira dijagnozu i naknadnu terapiju. Analiza PCR-a za određivanje hepatitisa RNA ne uvijek pouzdano pokazuje sliku bolesti, ponekad je dopuštena netočnost iu oba smjera.

Dijagnosticiranje virusa hepatitisa preporučuje se iscrpno ispitivanje.

Norma indikatora

Odsutnost JgM protutijela na virusni hepatitis C u rezultatima ispitivanja smatra se normom u analizi lančane reakcije polimeraze. Istodobno, nalaz serološke analize ukazuje na prisutnost antitijela na C virus i to je također unutar normalnog raspona. Kvalitativna definicija ne pokazuje intenzitet bolesti, samo otkriva uzročnik hepatitisa C u RNA. Ova analiza se ponavlja nakon tretmana kako bi se potvrdio stvarni oporavak.

odstupanja

Ako su JgM antitijela na HCV RNA prisutna, to ukazuje na razvoj infekcije. Bolest istodobno prolazi akutno ili kronično, očituje se u različitim fazama. Ako se bilježi smanjenje broja antitijela, analiza će pokazati da su rezultati liječenja postignuti tijekom oporavka. U dijagnozi se nalaze samo izuzetno rijetki slučajevi lažnih pozitivnih. Nalaze se kod žena tijekom trudnoće i kod osoba s drugim zaraznim bolestima.

Troškovi testiranja krvi i PCR za hepatitis C

Hepatitis C je upalna patologija u kojoj su zahvaćene stanice jetre. Bolest se razvija kao posljedica penetracije virusa hepatitisa C (HVC) u ljudsko tijelo.

Oblik bolesti može biti akutan ili kroničan.

Najčešći simptomi akutnog oblika patologije u većini pacijenata su odsutni, ponekad bolest popraćena bolnim senzacijama u abdomenu, smanjenom učinku, povećanom umoru, gubitkom apetita, tamnim sjenom mokraće, obezgojenjem izmeta, vlažnosti kože i sluznice, bolovima zglobova. Takvi se simptomi obično pojavljuju 6-8 tjedana nakon infekcije, ali se mogu pojaviti nakon šest mjeseci.

S razvojem takvih pojava potrebno je kontaktirati zdravstvenu ustanovu i proći sveobuhvatan pregled cjelokupnog organizma. Ispitivanje krvi za hepatitis C provodi se kao dio liječničkog pregleda.

Danas, uz pomoć suvremenih dijagnostičkih tehnika, ova se patologija može identificirati u početnoj fazi razvoja, što uvelike povećava šanse za potpunim liječenjem bolesti.

Za testiranje hepatitisa C potrebno je sljedeće skupine ljudi:

  • žene u dobi djeteta;
  • osobe s znakovima hepatitisa;
  • medicinsko osoblje;
  • potencijalnih organa i krvnih darovatelja;
  • ovisnici o drogama, osobe s HIV-om, promiskuitetni intimni život.

Popis potrebnih studija

Koji testovi trebam uzeti za hepatitis C? Za točno dijagnosticiranje bolesti, identificiranje uzroka i utvrđivanje stanja parenhima jetre potrebne su sljedeće studije:

  • opći test urina i krvi;
  • biokemijska analiza krvi;
  • PCR analiza;
  • test krvi za otkrivanje antitijela na HVC;
  • test krvi za postojeća antitijela vlastitim jetrenim stanicama;
  • biopsija jetre.

Dekodiranje krvnih testova za hepatitis C izvodi stručnjak. Detaljnije razmotrite svaku metodu istraživanja, kao i razumjeti koja je analiza hepatitisa C najtočnija.

Opća analiza

Kada obavljate opći test krvi za hepatitis C, možete procijeniti stanje bolesnika. Promjene u krvnim parametrima se ne percipiraju kao specifični simptomi hepatitisa, međutim, kod ove bolesti postoje takvi poremećaji kao što su:

  • smanjena koncentracija hemoglobina, trombocita i leukocita;
  • povećava sadržaj limfocita;
  • krvoženje zgrušavanja krvi;
  • povećava se stopa sedimentacije eritrocita (ESR).

Opća analiza urina omogućava otkrivanje u svom sastavu urobelin - žučni pigment koji se javlja u mokraći kao rezultat oštećenja funkcioniranja jetre.

Biokemijska analiza

Biokemijska analiza krvi u hepatitisu C omogućuje identificiranje takvih poremećaja kao što su:

  • povišene razine jetrenih enzima (alanin transaminaza - ALT i aspartat aminotransferaza - AST), koji ulaze u krv kada su oštećeni hepatociti. U normalnom stanju, ti pokazatelji za muškarce ne bi smjeli biti veći od 37 IU / l, za žene - ne više od 31 IU // l. Povećana koncentracija ALT i AST u asimptomatskom hepatitisu C često je jedini simptom ove bolesti. Pored toga, povećava se alkalna fosfataza u krvi glutamil transpeptidaze (obično ne više od 150 IU / l).
  • udio bilirubina (opće i izravno) u krvi je premašen. Ako razina žutog pigmenta u serumu prelazi 27-34 μmol / l, javlja se žutica (do 80 μmol / l u blagom obliku, 86-169 μmol / l - umjereno, iznad 170 μmol / l - u teškom obliku).
  • Smanjuje se razina albumina, povećava se koncentracija gama globulina, naprotiv. Gama globulin se sastoji od imunoglobulina - protutijela koja štite tijelo od tvari koje uzrokuju bolesti.
  • povećana koncentracija triglicerida u krvi.

PCR test

Pomoću PCR tehnike moguće je dijagnosticirati uzročnik ove bolesti. Izvođenje ove analize omogućuje otkrivanje virusa u krvi, čak i ako je njegova količina minimalna. PCR analiza za hepatitis C omogućava utvrđivanje postojećih infekcija u krvi već nakon 5 dana od trenutka infekcije, tj. Dugo prije pojave protutijela.

Ako je rezultat testa krvi za hepatitis C PCR-om pozitivan, to ukazuje na prisutnost aktivne infekcije u tijelu. Koristeći ovu metodu, možete provesti kvalitativno i kvantitativno istraživanje HVC RNA.

Tijekom kvalitativne analize PCR za hepatitis C, moguće je otkriti postojeći virus u ljudskom tijelu.

Ovaj dijagnostički postupak se provodi ako se u krvi detektira anti-HVC.

Dešifriranje analize za hepatitis C sadrži informacije da je infekcija otkrivena ili nije otkrivena u tijelu. Normalno, u krvi se ne nalaze patološke tvari.

Ako je hepatitis C test pozitivan, to znači da se patogen kontinuirano dijeli i zarazi jetrene stanice.

Rezultati ove analize mogu biti nepouzdani, moguća je u sljedećim slučajevima:

  • kontaminirana biomaterijala koja se koristi;
  • u prisutnosti heparina u krvi;
  • u prisutnosti kemijskih ili proteinskih supstanci (inhibitori) u ispitivanoj biomateričkoj, koja utječu na elemente PCR-a.

Kvantitativna analiza hepatitisa C daje informacije o količini virusa koji se nalazi u krvi, tj. Određuje virusni opterećenje. Ovim se konceptom podrazumijeva volumen HVC RNA prisutnih u krvi (na primjer, u 1 ml). U tumačenju kvantitativne analize za hepatitis C, ta se vrijednost izražava u digitalnom ekvivalentu, izmjerenom u IU / ml.

Krv za PCR za hepatitis C se uzima prije terapijskih mjera. Nakon što se analiza izvodi na 1, 4, 12 i 24 tjedna. Studija u 12. tjednu indikativna je i provodi se kako bi se procijenila učinkovitost medicinskih postupaka.

Ako je test za hepatitis C tijekom trudnoće pozitivan i vrijednosti virusnog opterećenja prekoračene, rizik prijenosa patogena od bolesne majke do djeteta povećava se nekoliko puta. Također, s povišenim vrijednostima virusnog opterećenja, provedba terapijskih mjera je teška.

Prema transkriptama testova za hepatitis C, ako su vrijednosti virusnog opterećenja veće od 800.000 IU / ml, onda je visoka. Ako su brojke ispod 400,000 IU / ml, razina viralnog opterećenja smatra se niska.

Analiza hepatitisa C PCR-om se smatra najtočnijom i ima nekoliko prednosti u odnosu na druge mogućnosti istraživanja, i to:

  • izravna dijagnoza uzročnika bolesti. Pri izvođenju tradicionalnih studija određena je prisutnost bjelančevinskih markera koji su otpadni proizvodi patogena. To samo ukazuje na to da je infekcija prisutna u krvi. Kod ispitivanja hepatitisa C pomoću PCR-a, moguće je odrediti vrstu patogena opasne patologije.
  • specifičnost tehnike. Tijekom ovog postupka određena je jedinstvena DNA regija u biomaterijalu koja odgovara samo jednoj vrsti patogena. To smanjuje vjerojatnost pogrešnih rezultata.
  • visoka osjetljivost. Kada obavljate PCR analizu, možete otkriti minimalnu količinu virusa. To je važno ako se identificiraju uvjetno patogene tvari koje prijete samo ako se njihova razina povećava.
  • Prilikom korištenja ove tehnike u jednom uzorku biomaterijala, može se otkriti nekoliko patogena odjednom.
  • mogu otkriti skrivene infekcije. Osim toga, analiza omogućuje dijagnosticiranje patogenih mikroorganizama koji žive unutar stanice i imaju visoku antigenu varijabilnost.

Ako su rezultati ispitivanja pozitivni, tragovi virusa se nalaze u biomaterijalu, a mreža ima infekciju u tijelu.

Negativna PCR analiza za hepatitis C znači da u biologiji nema tragova infekcije.

Imunološka studija

Ova metoda omogućuje prepoznavanje antitijela na sve vrste hepatitis virusa, kao i antitijela na stanice jetre vašeg tijela, čiji nastup doprinosi razvoju autoimunog hepatitisa.

Rezultati dobiveni tijekom istraživanja su važni 3 mjeseca, a zatim trebate ponovno donirati krv za hepatitis C.

Također je moguće izvesti ekspresnu studiju pomoću posebnih test traka. Ova analiza omogućava određivanje protutijela virusu C u sastavu krvi i sline, što se može izvesti samostalno, kod kuće.

Biopsija jetre

Za izvođenje takve analize uzima se element parenhima jetre i izvodi se histološki pregled dobivenih biomaterijala. To vam omogućuje procjenu stanja tijela: prepoznavanje upalnih, nekrotičnih žarišta, stadija fibroze i tako dalje.

Danas se koriste testovi koji zamjenjuju histološku analizu parenhima jetre.

Da bi se procijenio stupanj oštećenja jetre i intenzitet procesa upale, koriste se specifični venski krvni biomarkeri. Pomoću FibroTesta možete procijeniti stupanj rasta vlaknastog tkiva.

Prilikom izvođenja Actitesta možete dobiti informacije o intenzitetu patoloških procesa u parenhimu jetre. Korištenje Steatototesta može dijagnosticirati masno tkivo jetre i procijeniti opseg tog procesa. Fibromax se sastoji od svih gore navedenih testova i može uključivati ​​i druge studije.

Priprema za studiju

Koje se testove poduzimaju za hepatitis C i kako smo otkrili ovu ili onu vrstu istraživanja. Jednako je važno znati se pripremiti za analizu.

Da biste dobili pouzdane rezultate, preporučljivo je pridržavati se sljedećih zahtjeva:

  • Testovi hepatitisa C moraju se uzimati ujutro, na prazan želudac. Zadnji put hrana treba konzumirati najmanje 8 sati prije studija.
  • Biomaterijal se može prikupiti tijekom dana ili navečer. U ovom slučaju važno je da između zadnjeg obroka i analize prođe najmanje 5-6 sati.
  • prije davanja krvi za hepatitis C, čaj, kava, sok ili druga pića treba odbaciti, samo je dopuštena voda.
  • 48 sati prije studije potrebno je isključiti uporabu masne, pržene hrane i pića koja sadrže alkohol.
  • najmanje jedan sat prije analize, morate se suzdržati od pušenja.
  • analiza se ne smije obaviti odmah nakon ultrazvuka, instrumentalnog, rendgenskog pregleda, masaže ili fizioterapije.
  • jedan dan prije provedbe studije, potrebno je isključiti uporabu lijekova i intenzivne tjelesne aktivnosti. Emocionalni stres je također kontraindiciran.
  • Preporuča se provesti 15 minuta prije izvođenja studije u mirnom stanju.

Provođenje postupka prikupljanja krvi

Gdje se testirati na hepatitis C? Uzorkovanje biomaterijala za daljnja istraživanja provodi se u laboratoriju zdravstvene ustanove ili kod pacijenta.

Krv iz vene se uzima kako slijedi:

  • uz pomoć posebnog zatvarača zamotanog oko pazuha pacijenta, zaustavlja se venski protok krvi. Zahvaljujući takvim manipulacijama, vene će biti ispunjene krvlju i bit će vidljiviji, što će uvelike olakšati proces umetanja igle.
  • područje kože na mjestu ubrizgavanja igle brižno se liječi alkoholom ili tekućinom koja sadrži alkohol.
  • Igla je nježno umetnuta u venu, a na njega je pričvršćena ispitna cijev, posebno dizajnirana za prikupljanje krvi.
  • Neposredno nakon ubacivanja igle u venu, kopča za istiskivanje se uklanja iz pacijentove ruke.
  • nakon što se prikuplja volumen krvi potreban za analizu, igla se nježno uklanja iz vena.
  • na mjestu ubrizgavanja mora se nanositi sterilna pamučna brusilica ili gaza podloge navlažene alkoholom.
  • da se spriječi pojava hematoma, tampon treba pritisnuti s nekim naporom protiv područja uboda igle, savijati ruku na zglobu koljena i držati je u tom položaju nekoliko minuta. Takve akcije također će pomoći za brže zaustavljanje krvi.

Pod uvjetom da je tehnika unutarnje administracije dobra, ovaj postupak je apsolutno siguran i ne uzrokuje bolne senzacije.

U rijetkim slučajevima, nakon prikupljanja krvi, vene se mogu nabubriti. Taj se fenomen naziva "flebititis". Kompresija (ne vruća) pomoći će riješiti problem, treba ga primjenjivati ​​na natečene dijelove kože nekoliko puta dnevno.

Neki problemi mogu se pojaviti i ako postoji poremećaj krvarenja. Uzimanje aspirina, varfarina i drugih razrjeđivača krvi mogu uzrokovati krvarenje. Zato je prije izvođenja analize potrebno odbiti uzimanje lijekova. Ako se liječenje ne može otkazati, obavijestite stručnjaka.

Datumi i cijene

Koliko se ispituje hepatitis C? Rezultati krvnog testa za hepatitis mogu biti spremni za nekoliko sati, a za nekoliko dana (u pravilu, ne više od 8 dana). Trajanje pripreme rezultata ovisi o vrsti virusa i odabranoj metodi analize. Brža je studija provedena metodom PCR. Rezultati u ovom slučaju bit će spremni za samo nekoliko sati.

Koliko košta test hepatitisa C? Ovisno o klinici i složenosti studije, cijena postupka može varirati od 400 do 11.000 rubalja.

Morate biti svjesni da može trajati nekoliko tjedana kako bi se formirala dovoljna količina antitijela na HVC. Stoga, u ranoj fazi razvoja patologije, rezultat studije može biti lažno negativan.

Osim toga, dobivanje nepouzdanih podataka moguće je kod slabo kvalitetne analize i kršenja uvjeta prijevoza dobivenih biomaterijala (uzorci se moraju dostaviti u laboratorij najviše 2 sata nakon uzorkovanja krvi).

Ako je rezultat studije pozitivan, odmah se obratite liječniku infektivnih bolesti. Specijalist će provesti dodatan pregled i propisati odgovarajući tretman.

Provođenje PCR analize za hepatitis C i dekodiranje rezultata

Hepatitis C PCR analiza je studija čija je glavna svrha identificirati genetski materijal uzročnika. Analiza otkriva uzročnik ove bolesti korištenjem lančane reakcije polimeraze. Ova dijagnoza ima visok stupanj točnosti, specifičnost za otkrivanje odsutnosti ili prisutnosti virusne infekcije.

Bit dijagnoze

Da bi se izvršila PCR analiza za određivanje virusa hepatitisa C od pacijenta, uzima se venska krv koja potencijalno sadrži HCV RNA (ribonukleinske kiseline) željenog virusa.

PCR test za hepatitis C podrazumijeva postupak kada se sljedeće dodaju krvne čestice pacijenta:

  • primeri (kratke umjetno sintetizirane regije potrebnog gena);
  • posebni enzim (RNA polimeraza).

Nakon prikupljanja biološkog materijala poslan je za istraživanje u laboratoriju. Jedan dio krvi je potreban za izravnu PCR analizu, drugi se šalje na studiju pomoću ELISA metode. Enzim je u kratkom vremenu sposoban povećati broj genetskog materijala virusa patogena. U posebnom aparatu se provodi nekoliko ciklusa toplinskih i hlađenih procesa. U završnoj fazi, dobiveni materijal se uspoređuje s genima virusa i zaključuje se o prisutnosti ili odsutnosti patologije u tijelu pacijenta.

Bit i ponašanje PCR analize u laboratoriju. Snimio Sibirski MedicinskiLaboratorij.

Vrste istraživanja

Postoje 3 vrste dijagnostike koje omogućuju određivanje prisutnosti virusa hepatitisa C u ljudskom tijelu:

  • genotipizacija;
  • kvaliteta;
  • kvantitativna.

Kvalitativna metoda

Dijagnoza hepatitisa C kvalitativnom metodom primjenjiva je za pacijente kod kojih su otkrivena protutijela na virusu u krvi. U slučaju prisutnosti akutne faze HCV RNA, takve dijagnostičke mjere omogućuju određivanje prisutnosti bolesti u roku od 1-2 tjedna nakon infekcije. Tijekom tog perioda, antitijela na hepatitis C još se ne mogu razviti.

Kvantitativna metoda

Kvantitativna dijagnostička metoda koristi se za određivanje koncentracije virusa u uzorcima krvi. Takav test za viremiju (stupanj koncentracije) omogućuje točno određivanje broja jedinica virusne RNA. Krajnji rezultat izražava se u odgovarajućem volumenu. Ako govorimo o kvantitativnoj analizi, indikatori se mjere u 1 ml.

Parametar viralnog opterećenja označava razinu zarazne bolesti, tj. Odražava stupanj infektivnosti pacijenta. U praksi to znači da što je veća koncentracija virusa u krvi, to su veće šanse za pacijenta da inficiraju druge hepatitisom C. Kvantitativna metoda istraživanja također omogućuje utvrđivanje kvalitete i učinkovitosti liječenja.

genotipizacija

Genotipizacija otkriva mutacije uzročnika bolesti. Prije propisivanja plana liječenja utvrđuje se genotip virusa: ovisi o kvaliteti i trajanju terapije. Na primjer, u liječenju bolesti tipa I, učinkovitost je 60%, u slučaju II, III tipa - oko 80%.

Prednosti PCR analize za hepatitis

Među glavnim prednostima postupka su:

  1. Mogućnost rane dijagnoze. PCR analiza može detektirati prisutnost virusa u ranoj fazi infekcije.
  2. Niski rezultati pogrešaka. Proučavan biološki resurs omogućuje dijagnosticiranje dijela genetskog materijala koji je karakterističan samo za jednu vrstu virusne infekcije. Ta okolnost omogućuje spriječiti lažne dijagnostičke rezultate.
  3. Visoki stupanj osjetljivosti. PCR analiza je u stanju otkriti RNA virus u malim količinama, što također omogućava praćenje latentnih infekcija u vremenu.

Indikacije za

Testiranje PCR-a za hepatitis C potrebno je, ako je dostupno:

  • s kontaktima s bolesnim osobama, što može dovesti do infekcije;
  • simptomi ciroze jetre (povećanje slezene, neobične promjene veličine jetre, detekcija venskog pleksusa na abdomenu ispod kože);
  • pozitivni rezultati ELISA;
  • povećana aktivnost AST i ALT (očituje se u biokemijskoj analizi krvi);
  • potreba kontrole provođenja antivirusne terapije;
  • početnu fazu liječenja zbog potrebe za uspostavljanjem virusnog opterećenja;
  • provođenje završne faze terapije kako bi se uklonile moguće rekurencije;
  • prisutnost hepatitisa B u bolesnika da se isključi razvoj mješovite oštećenja jetre.

Kako se pripremiti za davanje krvi za PCR studije

Priprema za PCR analizu uključuje sljedeće preporuke:

  • krv se uzima ujutro;
  • analiza se obavlja na prazan želudac pa je poželjno da se odmori između zadnjeg obroka od 8-10 sati;
  • nekoliko dana prije dijagnoze treba isključiti masnu, začinjenu i prženu hranu, alkoholna pića i pušenje;
  • jedan dan prije analize treba se suzdržati od teških tjelesnih napora, isključujući nastavu u teretani ili bazenu.

Rezultati analize: norme i odstupanja

Sama analiza nije dugo vremena, a visokokvalificirani stručnjak hepatologa ili zaraznih bolesti dešifrira rezultate PCR-a za hepatitis C. Na temelju rezultata analize, pacijent je dijagnosticiran.

Da bi se ispravno dešifrirali rezultati istraživanja, uzeti su u obzir sljedeći pokazatelji:

  • biokemijska analiza krvi;
  • ultrazvučni podaci;
  • rezultati biopsije.

Tumačenje kvantitativne analize

Pri dobivanju rezultata PCR kvantitativne analize uzeti su u obzir sljedeći indikatori:

Osnovni testovi hepatitisa C

Virusni hepatitis C ozbiljan je medicinski i društveni problem. Oko 180 milijuna ljudi danas pate od ove bolesti, svake godine 350 tisuća umire. Dugo latentno (asimptomatsko) tijek hepatitisa C dovodi do kasne dijagnoze. Analiza hepatitisa C provodi se kako bi se dijagnosticirala bolest, diferencijalna dijagnoza, uz njegovu pomoć, utvrdila prethodno prenesenu bolest "stojeći". Istraživanje se upotrebljava u bolesnika s simptomima hepatitisa C, povišenim razinama jetrenih enzima, pri dobivanju informacija o prethodno prenesenom hepatitisu neodređene etiologije, kod osoba kojima je izložen rizik i na probirima.

Dijagnoza hepatitisa C provodi se u dvije faze:

Faza 1 Određivanje prisutnosti u serumu antitijela na hepatitis C virus (anti-HCV).

Faza 2 U prisutnosti anti-HCV, provodi se test za prisutnost RNA (ribonukleinska kiselina) PCR-om za hepatitis C. Test omogućuje prepoznavanje faze procesa - "aktivno / neaktivno", kako bi se riješilo pitanje potrebe za liječenjem. Poznato je da oko 30% osoba zaraženih virusom hepatitisa C sami oslobađa zarazu, jer imaju jak imunološki sustav i ne trebaju liječenje. Korištenje PCR određuje se genotipom virusa. Različiti genotipovi različito reagiraju na liječenje.

Stupanj oštećenja jetre u hepatitisu C određuje se biopsijom ili drugim invazivnim i neinvazivnim testovima (na primjer, fibroznost). Stupanj jetrene steatoze određuje steatotesta. U svim slučajevima, dijagnoza hepatitisa C trebala bi se temeljiti na podacima iz epidemiološke istrage, klinike bolesti i podataka biokemijskih krvnih testova.

Sl. 1. Teški učinci virusnog hepatitisa C - intenzivni ascites.

Hepatitis C test: anti-HCV

Anti-HCV protutijela (anti-HCV) su specifični markeri infekcije. U tijelu bolesne osobe, specifična protutijela su proizvedena proteinima hepatitis C virusa (antigeni) - imunoglobulini klase IgM i IgG (anti-HCV IgM / IgG).

Kada se dobije pozitivan rezultat za antitijela na hepatitis C virus, provodi se potvrda - određivanje ukupnih antitijela na strukturne i nestrukturne proteine ​​virusa. Strukturne proteinske ovojnice E1 i E2 virusa proizvode se pomoću anti-HCV IgM, nukleokapsidnog proteina C-cor (anti-HCV IgG) i 7 ne-strukturnih proteina - enzima NS-anti HCV NS IgG.

Enzimski povezani imunosorbentni test (ELISA) koristi se za otkrivanje protutijela na hepatitis C virus. Testovi potvrde - RIBA (rekombinantni imunoblot), rjeđe Inno-Lia (analiza sintetičkih peptida) koriste se za potvrđivanje (+) ELISA rezultata.

Anti HCV IgM

  • Protutijela HCV IgM pojavljuju se u serumu 4-6 tjedana nakon infekcije i brzo dostižu maksimum. Na kraju akutnog procesa (nakon 5-6 mjeseci) njihova koncentracija se smanjuje.
  • Dugotrajna registracija prisutnosti anti-HCV IgM ukazuje da je hepatitis C stekao kronični tijek.
  • Povećanje razine IgM u razdoblju kroničnog hepatitisa C ukazuje na reaktivaciju infektivnog procesa.
  • Razina IgM imunoglobulina omogućuje procjenu učinkovitosti liječenja.

Anti HCV IgG

HCV IgG antitijela pojavljuju se u serumu bolesnika 11 do 12 tjedana nakon infekcije. Kod 5-6 mjeseci, zabilježena je koncentracija vrha. Sljedeća antitijela

ostati na stalnoj razini tijekom trajanja bolesti u akutnom razdoblju i tijekom perioda oporavka.

Ukupno protutijela na hepatitis C virus

Ukupno antitijela na virus hepatitisa C (ukupni anti HCV) koriste se za dijagnosticiranje "svježih" slučajeva bolesti. Ukupno protutijela su antitijela na nukleokapsidni protein C - cor (anti HCV IgG) i 7 nestrukturnih NS proteinskog enzima (anti HCV NS IgG) anti HCV NS3, anti HCV NS4 i anti HCV NS5.

Ukupno protutijela na hepatitis C virus pojavljuju se u serumu zaražene osobe nakon 11 do 12 tjedana od početka infekcije, postižu vrhunac za 5 do 6 mjeseci i ostaju na stalnoj razini tijekom cijelog razdoblja bolesti u akutnom razdoblju i tijekom 5 do 9 godina nakon perioda oporavka,

Svaka od vrsta antitijela ima nezavisnu dijagnostičku vrijednost:

  • AntiHCVC (cor) glavni su pokazatelji kontakta s hepatitisom C.
  • AntiHCVNS3 detektirao je jedan od prvih u procesu serokonverzije (proizvodnja antitijela kao odgovor na prisutnost virusa), ukazuju na ozbiljnost infektivnog procesa i ukazuju na visoki virusni opterećenje. Uz njihovu pomoć, nasljedni hepatitis C se određuje u bolesnika koji ne sumnjaju na prisutnost infekcije. Dugotrajna prisutnost anti-HCV NS3 u serumu ukazuje na visoki rizik od kroničnosti procesa.
  • AntiHCVNS4 sugerira da zarazni proces ima dug put. Razina titra antitijela može se procijeniti na stupnju oštećenja jetre.
  • AntiHCVNS5 ukazuje na prisutnost virusne RNA. Njihovo otkriće u akutnom razdoblju preteča je kroničnosti procesa. Titri visokih antitijela na pozadini liječenja upućuju na to da pacijent ne reagira na liječenje.
  • AntiHCVNS4 i antiHCVNS5. Ova vrsta antitijela pojavljuje se u kasnim fazama razvoja hepatitisa. Njihovo smanjenje ukazuje na stvaranje remisije infektivnog procesa. Nakon tretmana, titri anti-HCV NS4 i anti-HCV NS5 smanjuju se u roku od 8 do 10 godina. Ova vrsta antitijela ne štiti od reinfekcije.

Sl. 2. Macrodrug od jetre. Ciroza jetre u hepatitisu C.

Analiza dekodiranja za hepatitis C

Odsutnost antitijela na virus hepatitisa C naznačena je pojmom "Norm". Međutim, to ne znači uvijek odsutnost bolesti kod ljudi. Tako je odsutnost protutijela u krvi zaražene osobe zabilježena sve dok se ne pojave u krvi - do 6 mjeseci od trenutka infekcije (prosječno 12 tjedana). Razdoblje odsutnosti protutijela u krvi zaražene osobe naziva se "serološkim prozorom". Testni sustavi treće generacije (ELISA-3) imaju visoku specifičnost (do 99,7%). Oko 0,3% zabilježilo je lažne pozitivne rezultate.

Prisutnost anti-HCV ukazuje na trenutnu infekciju ili prošlu infekciju.

  • Otkrivanje IgM protutijela i anti HCV Cor Cor IgG, povećanje titra anti HCV CorE IgG i (+) PCR rezultira prisutnošću kliničkih i laboratorijskih znakova akutnog hepatitisa, što ukazuje na akutno razdoblje bolesti.
  • Detekcija anti-IgM, anti-HCV CorE IgG, anti-HCV NS IgG i (+) PCR rezultiraju prisutnošću kliničkih i laboratorijskih znakova hepatitisa, što ukazuje na reaktiviranje kroničnog hepatitisa C.
  • Detekcija anti-HCV Coré IgG i anti-HCV NS IgG u odsutnosti kliničkih i laboratorijskih znakova hepatitisa i negativnog PCR rezultata ukazuju na to da pacijent ima kronični hepatitis u latentnoj fazi.

Sl. 3. Macrodrug od jetre. Primarni karcinom jetre. Jedan od razloga za razvoj onkologije je ciroza jetre, razvijena na pozadini kroničnog hepatitisa C.

PCR analiza za hepatitis C

Lančana reakcija polimeraze (PCR) je "zlatni standard" za dijagnozu virusnog hepatitisa C. Visoka osjetljivost testa omogućava otkrivanje genetskog materijala virusa (RNA), čak i ako ih ima samo nekoliko u istraživanom materijalu. PCR je u stanju otkriti RNA viruse mnogo prije pojave protutijela u serumu, ali ne ranije od 5. dana od trenutka infekcije. Kada se PCR detektira bolest, RNA virusi se otkrivaju ne samo u serumu već iu biopatima jetre.

  • Lančana reakcija polimeraze omogućuje određivanje prisutnosti ili odsutnosti virusa hepatitisa C u krvi i odlučivanje o početku liječenja. Poznato je da se do 30% pacijenata oslobađa samih infekcija, budući da imaju snažan imunološki sustav i ne trebaju liječenje.
  • Hepatitis C PCR se koristi za praćenje učinkovitosti liječenja.
  • PCR se koristi u odsutnosti protutijela u krvi, ali u prisustvu jakih sumnji na hepatitis C (povećana razina alkalne fosfataze, ukupni bilirubin, 2 puta veći broj hepatičnih enzima AST i ALT).
  • PCR analiza za hepatitis C se koristi za kontrolu intrauterinog prijenosa virusa hepatitisa.

Virusni opterećenje hepatitisa C

Korištenje PCR analize, moguće je odrediti ne samo prisutnost virusne RNA u krvi - kvalitativna analiza (otkrivena / ne otkrivena), već njihov broj - virusni opterećenje (broj jedinica virusne RNA u 1 ml krvi). Kvantitativni pokazatelj PCR koristi se za praćenje učinkovitosti liječenja hepatitisa C.

Metode korištene za PCR imaju različitu osjetljivost. U Ruskoj Federaciji, u skladu s metodološkim preporukama iz 2014., preporučuje se primijeniti metode koje imaju osjetljivost od 25 IU / ml ili manje. Prema preporukama Europske udruge za proučavanje jetre iz 2015., predlaže se primijeniti metode za određivanje virusne RNA s osjetljivošću od 15 IU / ml ili manje.

Ovisno o osjetljivosti ispitnog sustava, pacijent prima jedan ili drugi rezultat studije:

  • Najmanja osjetljivost COBAS AMPLICOR analizatora je 600 IU / ml (analizator stare generacije).
  • Minimalna osjetljivost analizatora HCB-TEST COBAS AMPLICOR iznosi 50 IU / ml, što je 100 primjeraka po ml.
  • Minimalna osjetljivost analizatora HCV RealBest RNA iznosi 15 IU / ml, što je 38 primjeraka po ml (uključeno u skupinu modernih testnih sustava). Specifičnost tih analizatora iznosi 100%. Pomoću njih otkrivene su RNA virusa hepatitisa C podtipova la i lb, 2a, 2b, 2c i 2i, 3, 4, 5a i 6.

Ako postoje kopije RNA ispod prag osjetljivosti ovog analizatora, pacijent dobiva odgovor "nije detektiran".

Sl. 4. Primjer PCR analize (kvantitativni test). Virusni opterećenje određuje se za hepatitis C.

Tumačenje rezultata PCR analize za hepatitis C

  • Odsutnost RNA virusa ukazuje na odsutnost infekcije.
  • Odsutnost RNA protiv prisutnosti protutijela u krvi ukazuje na nestanak virusa hepatitisa C pod utjecajem liječenja ili samoizlječivosti.
  • U nekim slučajevima, virus je prisutan u krvi, ali na subliminalnim razinama, kada koncentracija nije zarobljena analizatorima. Takvi bolesnici ostaju opasni u smislu infekcije.
  • Otkrivanje RNA virusa tijekom 6 uzastopnih mjeseci u bolesnika s akutnim hepatitisom C sugerira da je bolest uzela kronični put.
  • Smanjenje virusne RNA tijekom liječenja ukazuje na učinkovitost terapije i obrnuto.

Sl. 5. Masna hepatoza. Jedan od uzroka oštećenja jetre je virusni hepatitis C.

Osnovni biokemijski krvni testovi za hepatitis C

Biokemijski krvni testovi pomažu uspostaviti funkcionalno stanje mnogih ljudskih organa i sustava.

Hepatici enzimi ALT i AST

Hepatski enzimi su sintetizirani intracelularno. Oni su uključeni u sintezu aminokiselina. Velik broj njih nalazi se u stanicama jetre, srca, bubrega i mišića skeleta. Uz poraz organa (kršenje integriteta staničnih membrana), enzimi ulaze u krv, gdje njihova razina raste. Povišene razine enzima zabilježene su porazom (liza, uništenje) jetrenih stanica, infarkta miokarda i drugih bolesti. Što je veća razina transaminaza u serumu, više stanica je uništeno. ALT prevladava u jetrenim stanicama, AST - u miokardijalnim stanicama. Uz uništavanje jetrenih stanica, razina ALT povećava se 1,5 do 2 puta. Razaranjem miokardijalnih stanica razina AST se povećava za 8 do 10 puta.

Pri dijagnosticiranju kroničnog virusnog hepatitisa potrebno je obratiti pozornost na omjer AST / ALT (koeficijent de Ritis). Višak AST-a preko ALT-a ukazuje na oštećenje jetrenih stanica.

  • Norma AST za muškarce je do 41 jedinice / l, žene - do 35 jedinica / l, djeca starija od 12 godina - do 45 jedinica / l.
  • Norma ALT za muškarce je do 45 jedinica / l, žene - do 34 jedinice / l, djeca od 12 godina i stariji - do 39 jedinica / l.
  • Normalno (u zdravih ljudi) omjer AST / ALT kreće se od 0,91 do 1,75.

bilirubin

Bilirubin je probavni proizvod hemoglobina. Bilirubin u krvi se nalazi u obliku neizravnog (do 96%) i izravnog (4%). Proces razgradnje ove tvari javlja uglavnom u stanicama jetre, gdje se izlučuje iz tijela žuči. Razaranjem jetrenih stanica povećava se razina bilirubina u serumu. Normalno, ukupni sadržaj bilirubina je manji od 3,4 - 21,0 μmol / L. Na razini od 30-35 μmol / L i iznad, bilirubin prodire u tkiva, zbog čega koža i sclera postaju žućkast.

Sl. 6. Kada hepatitis C u krvi poveća razinu bilirubina. Tvar prodire u tkiva, zbog čega koža i sclera postaju žućkast.

PCR dijagnostika za hepatitis C

Hepatitis C je upala jetrenih stanica koja se javlja kao posljedica infekcije virusom HCV (hepatitis C) kroz kontakt s krvlju zaražene osobe. Genetički kod flavivirusnog HCV-a prenosi se molekulom RNA (ribonukleinska kiselina) koja je sadržana u strukturi virusa. Ovaj fenomen koji ugrožava život razlikuje se tajnovitosti u početnoj fazi patologije. Vremenski interval između infekcije i početka simptoma (odgovor imunološkog sustava) može biti od jednog mjeseca do šest mjeseci. U pravilu, bolest ima kronični oblik i teško je izliječiti.

Moderna medicina omogućuje dijagnosticiranje patologije s manjim oštećenjem jetre. Najčešće i učinkovitije dijagnostičke metode uključuju PCR analizu. U ovom članku razmotrite što je to i kakve postoje.

Što je studija

PCR analiza za hepatitis C je laboratorijska pretraga koja detektira flavirus, genetički materijal ribonukleinske kiseline (RNA). Određuje broj RNA molekula u krvi, kvalitetu biološkog materijala, genetsku vrstu HCV flavirusa.

PCR metoda za hepatitis C omogućuje otkrivanje minimalne količine flavirusa prije formiranja protutijela, u pravilu, ubrzo nakon infekcije.

Studija se često naziva RNA analizom, jer otkriva čestice ribonukleinske kiseline veličine 30-60 nm sadržane u flavavirusu.

Istraživanje se provodi na sljedeći način: na prazan želudac, pacijent daje krv iz vena, a zatim se ispituje različitim metodama:

  • Real-time PCR provodi se na zatvorenom automatskom načinu i ima nižu granicu za otkrivanje RNA virusa od 15 IU / ml;
  • COBAS AMPLIKOR s osjetljivošću od 50-100 IU / ml.

Što je veći prag osjetljivosti dijagnostičke tehnike, veća je vjerojatnost otkrivanja najnižeg sadržaja virusa u biološkom materijalu koji se istražuje.

Koje vrste analize se koriste

Analiza koja se uspješno koristi nekoliko desetljeća naziva se PCR hepatitis, a može se otkriti vrlo lako i brzo. U medicini postoje dvije metode reakcije, bitno različite jedna od druge:

  • kvalitativna metoda otkriva prisutnost u biološkom materijalu genetskog izvora određenog virusa;
  • kvantitativna analiza mjeri broj genetskih tvari, koji omogućuje određivanje stupnja patologije ili procjenu učinkovitosti terapijskog tečaja;
  • genotipizacija određuje vrstu virusa prisutnog u tijelu.

Općenito, test krvi pomaže u identificiranju prirode viremije i genetskog tipa patogena. U pravilu, studija se provodi 1 puta ovisno o stupnju osjetljivosti dijagnostičkog sustava. Ako je potrebno, ponovno ispitivanje provodi se pomoću ultrazvučnog reagensa.

Visoka kvaliteta PCR

Što je visoko kvalitetna PCR RNA za hepatitis C? Bit reakcije leži u prisutnosti hepatitisa RNA sekvence, a reakcija je moguća samo u prisutnosti virusnih proteina slične etimologije u ELISA. U procesu usporedbe opažaju se opterećenje i moguća oštećenja područja jetre.

Značajka ove metode je sposobnost otkrivanja čak i prisutnosti zasebnog gena.

Treba napomenuti da nakon primanja rezultata PCR i ELISA testa pacijent treba odgovarajući tretman, bez obzira na konačni rezultat imunološkog ispitivanja enzima. Pozitivno upućuje na infekciju, a PCR negativno ukazuje na smanjeni broj virusnih čestica u odnosu na razinu osjetljivosti.

Postoji nekoliko uvjeta koji utječu na proizvodnju negativnog PCR i ELISA:

  • nedostatak odgovarajućih uvjeta za prikupljanje materijala;
  • dobivena analiza sadrži kontaminaciju;
  • u slučaju rane injekcije heparina pacijentu.

U dijelu pacijenta nije potrebno pridržavati se određenih pravila za uzimanje uzoraka krvi za PCR analizu, u ovom slučaju kvaliteta analize ovisi o medicinskom stručnjaku koji obavlja postupak. Sposobnost utvrđivanja prisutnosti bolesti (osobito u akutnom obliku) pojavljuje se unutar nekoliko tjedana nakon infekcije.

Kvantitativna analiza

Preporuča se kvantitativni test za otkrivanje količine virusa neposredno prije formiranja daljnje terapije i reakcije tijela. Proces uzimanja krvi vrši se na sličan način kao kod visokokvalitetnih PCR i ELISA, jedini uvjet je nepostojanje mogućnosti pušenja pacijenta prije postupka.

Što se tiče karakteristika podataka dobivenih kao rezultat studije, povećano opterećenje karakterizirano indikatorima od 800000 IU / ml, nisko - 400000 IU / ml. Prisutnost virusa u tijelu pacijenta je označena PCR-om jer hepatitis nije negativan kvalitativni test.

Ovakva istraživanja omogućuju određivanje opasnosti bolesnika od ljudi oko sebe. Na primjer, određivanje visoke razine ukazuje na povećanu infektivnost pacijenta. Osim toga, rezultati analize pomažu formulirati daljnje najučinkovitiji tretman i utvrditi koliko se postojeće terapije smatra učinkovitima.

Brzi negativni odgovor testova ukazuje na uspjeh odabrane tehnike, a spora označava potrebu prilagodbe i uporabu različitog tretmana.

Postupak provođenja analize ovisi o specifičnom danu bolesti. Prvo određivanje provodi se prvog dana nakon što je pacijent primljen u bolnicu, a postupak se ponavlja nakon 4, 12 i 24 tjedna nakon uzimanja lijekova.

Dakle, kvantitativna analiza pokazuje koji je tretman najučinkovitiji, trajanje raspoložive terapije i opasnost pacijenta u odnosu na druge ljude.

genotipizacija

U istraživanju analize materijala, važno je utvrditi točnost genotipa virusa, koji se odvija. Trenutno postoji 11 vrsta virusa hepatitisa C, koji zauzvrat uključuju određene podvrste.

Sve ove vrste različito reagiraju na različite tretmane, a pojedine vrste su apsolutno otporne na mnoge lijekove.

Genotip omogućava određivanje i prikaz stanja jetre. Nije neuobičajeno da se rezultati bilježe "nije upisano", što znači da ovaj testni sustav ne otkriva virus u krvi pacijenta. To se može otkriti ako određeni genotip ne odgovara ovoj zoni. U takvoj situaciji analiza se ponavlja, a osjetljiviji sustav se koristi za proučavanje materijala.

Ultra osjetljiva metoda

Ultrazvučna metoda je nužna u određenim slučajevima kada se dijagnoza hepatitisa ne može provesti drugim metodama, a kada se analiza odredi liječnik:

  • u slučaju sumnje na prisutnost virusa hepatitisa C u bolesnika s latentnim tipom bolesti;
  • prisutnost antitijela protiv virusa hepatitisa C, koja nije potvrđena PCR dijagnostikom;
  • kako bi se odredila kvaliteta učinkovitosti izabrane metode liječenja i potvrdila uklanjanje bolesti.

Osjetljivost ove metode je znatno veća od onih najčešće korištenih, no ova metoda ne isključuje dobivanje lažnih rezultata, pozitivnih i negativnih. U takvoj situaciji važno je kontrolirati kvalitetu postupka i mogućnost kontaminacije samog materijala.

Objašnjenje PCR analize

Dekodiranje analize provodi se na temelju prezentiranih materijala, dok rezultati laboratorijskih istraživanja uključuju određene podatke koji su gore opisani.

Dekodiranje može uključivati ​​pozitivnu reakciju lančane reakcije PCR polimeraze i negativnu ELISA u testu, što znači da pacijent nema znakove hepatitisa C u krvi, ali je u prošlosti prenio akutni oblik bolesti. U pravilu, kada dijagnosticiraju, stručnjaci se pribjegavaju korištenju PCR testnih pokazatelja.

Sažeti sve gore navedeno, može se zaključiti da je tijekom analize važno slijediti sva pravila i preporuke kako bi rezultati bili što precizniji, a na temelju dobivenih podataka moguće je utvrditi učinkovitost korištene terapije i daljnje šanse za potpuno oporavak.

PCR analiza za hepatitis C

Za dijagnozu "kroničnog virusnog hepatitisa C (CVHS)" potrebno je sveobuhvatno ispitivanje osobe koja uključuje kliničke, laboratorijske i instrumentalne studije. Važno je sa stajališta dijagnoze ispravne dijagnoze PCR metoda - lančana reakcija polimeraze.

Što ova analiza pokazuje i zašto je to potrebno?

Ovaj laboratorijski postupak otkriva virus RNA hepatitisa C u ljudskoj krvi. Uz enzimski povezani imunosorbentni test (ELISA) za antitijela na virus, PCR se koristi za dijagnosticiranje CVHC i genotipa njegovog patogena. Ovo istraživanje jedno je od najnovijih metoda laboratorijske dijagnostike. Njegova pouzdanost na CVHS prelazi 97%, što se smatra vrlo dobrim pokazateljem za istraživanje.

Postoje tri krvi PCR testa za CVHC: kvalitativni, kvantitativni i genotipiziranje virusa. Prva studija (kvalitativna analiza) virusa otkriva ga u krvi, i stoga se koristi samo za dijagnozu.

Druga (kvantitativna) studija određuje stupanj virusnog opterećenja na tijelu, pa se stoga koristi za praćenje učinkovitosti terapije.

Treće PCR (genotipizacija) pojašnjava dijagnozu, uspostavljajući genotip virusa, što je vrlo važno za imenovanje ispravnog antivirusnog tretmana.

Bit tehnike lančane reakcije polimeraze je uporaba enzima koji umnožavaju genetički materijal patogena u biomaterijalu. U procesu takve replikacije, epruveta s krvlju se nekoliko puta grije i ohladi na temperaturu potrebnu za ubrzavanje enzimske reakcije. Kao rezultat ovih manipulacija, količina virusnog genoma povećava se mnogo puta, čime je moguće otkriti čak i minimalno.

PCR dijagnostika ima mnoge prednosti u odnosu na druge laboratorijske testove:

  • visoka osjetljivost - 97-98%;
  • zajamčena analitička specifičnost (točno otkriva patogena koju želite pronaći, a ne njezin srodni soja);
  • brzina provođenja (ne traje više od 2 dana da bi se zaključio).

Tri vrste PCR testova

Visoka kvaliteta PCR analize je dodijeljena svim pacijentima u kojima ELISA analiza detektira antitijela na HVGS virus. Nakon izvođenja visokokvalitetnog PCR-a mogu se dobiti dvije opcije odgovora: "RNA otkrivena" ili "RNA nije otkrivena". Za otkrivanje minimalne količine virusa u krvi potrebno je provesti sustave s osjetljivošću najmanje 50 IU / ml. Ako je koncentracija virusa u krvi pacijenta manja od onoga što dijagnoza može odrediti, rezultat studije može biti lažno negativan. Da bi se izbjegla takva dijagnostička pogreška, laboratoriji koji obavljaju PCR dijagnostiku trebaju biti opremljeni s vrlo osjetljivim testnim sustavima. Na primjer, u laboratoriju "Invitro" koriste se testovi osjetljivosti od 15 IU / ml. Laboratorijski radnici dužni su na svoj prvi zahtjev dati informacije o osjetljivosti ispitivanja pacijenata i liječnika.

Kvantitativna analiza PCR-a određuje stupanj viremije, tj. Koncentraciju patogena u krvi, virusnom opterećenju. Rezultat ove studije, za razliku od visokokvalitetnog PCR, izražava se brojevima, na primjer, 2 x 10 * 6 IU / ml, što znači 2 milijuna međunarodnih jedinica u 1 ml krvi. Neki laboratoriji koriste drugi indikator - broj kopija / ml. Ove dvije pokazatelje lako je pretvoriti: 1 međunarodna jedinica jednaka je 4 kopije RNA. Tako, 2 x 10 x 6 IU / ml će značiti da 8 x 10 x 6 kopija virusne RNA u 1 ml, tj. 8 milijuna primjeraka u 1 ml krvi.

Genotipizacija je definicija jednog od šest genotipova virusa. Klinička slika, brzina razvoja komplikacija jetre i prognoza za budućnost pacijenta ovise o genotipu uzročnika. Genotip virusa vrlo je važan već u fazi dijagnoze, budući da kombinacija lijekova i trajanje terapijskog tečaja koji se dodjeljuje pacijentu ovise o njegovoj ispravnoj odluci.

Međutim, čak i ovo naizgled "savršeno" laboratorijsko istraživanje ima svoje padove:

  • studija replicira genetski materijal svih patogena, čak i one koji ne žive, što može iskriviti rezultat. Stoga, radi praćenja učinkovitosti uz pomoć PCR-a, reanaliza se provodi najranije 2 mjeseca nakon prethodnog, tako da mrtvi virusi mogu "napustiti" tijelo pacijenta;
  • dio viralnog genoma, koji se određuje pomoću ispitnih sustava, teoretski može biti prisutan u drugim virusima ili mikroorganizmima, pa postoji mogućnost lažnog pozitivnog odgovora;
  • virusi se brzo mijenjaju. Ponekad je brzina i opseg mutacije virusa tako visoka da se testni sustav zaustavi od hvatanja genoma. Kao rezultat toga, moguć je negativni negativni rezultat.

Kako bi se razriješili te nedostatke, proizvođači laboratorijskih sustava za testiranje PCR dijagnostike neprekidno provode svoje testove, uključujući križne reakcije i osjetljivost na određeni genotip virusa.

Kako uzeti PCR test za hepatitis C?

Da bi se PCR ispitivanje zaključilo pouzdano, potrebno je strogo slijediti pravila pripreme za njegovo ponašanje:

  • istraživanje se provodi na prazan želudac (glukoza, masti, minerali koji ulaze u krv iz hrane, mogu utjecati na brzinu i kvalitetu enzimske reakcije);
  • jaz između posljednjeg obroka i uzorkovanja krvi za analizu trebao bi biti najmanje 8 sati;
  • uoči studije zabranjeno je uzimanje alkohola i konzumiranje masne hrane čije se razdoblje eliminacije produžuje;
  • dan prije odlaska u laboratorij treba izbjegavati jaki fizički i emocionalni stres;
  • dok se vrijeme uzimanja krvi ne preporuča pušiti.

Kako bi izbjegli pojavu lažnih zaključaka, navodni pacijent mora doći u laboratorij malo prije nego će se uzeti krv. Potrebno je 15-20 minuta da bi osoba udahnula, smirila se. Adrenalin, koji je prisutan u krvi nakon brzog hoda, može utjecati na rezultat ispitivanja.

Ako pacijent koji se upućuje na analizu uzima bilo kakve lijekove, o tome obavijestiti liječnika. Moguće je da će neki od njih morati biti odbili neko vrijeme (ako je moguće).

Rezultat analize PCR za hepatitis C

Dekodiranje rezultata koji su uključeni u laboratorijski doktor laboratorija koji je provela analizu. Dekodiranje je definicija odstupanja rezultata dobivenog normom. Stopa pokazatelja uspostavlja izravno proizvođač ispitnog sustava, koji koristi laboratorij za dijagnostiku. Stoga ne iznenađuje da se u nekim laboratorijima utvrđuje količina virusa u IU / ml, a kod drugih u kopijama / ml.

Nakon što je primio zaključak, potrebno ga je pravilno tumačiti. Liječenje rezultata studije treba obaviti liječnik pacijenta s hepatitisom C. Tek nakon objektivnog, instrumentalnog i laboratorijskog pregleda bolesnika, liječnik može dobiti dovoljnu količinu podataka za ispravno tumačenje dobivenih PCR rezultata.

Procjena kvalitativne analize, u pravilu, ne uzrokuje poteškoće, čak ni kod bolesnika. Rezultat može biti samo jedan: "otkriven" ili "nije otkriven". U ovom slučaju, drugi od njih je norma.

Pokazatelji kvantitativne analize teško je tumačiti. Prikazuje stupanj opterećenja virusom na pacijenta. Čak i među hepatolozima ne postoji konsenzus o načinu liječenja otkrivene vireme. Većina liječnika je sklona vjerovati da treba uzeti u obzir veliko opterećenje od više od 8 × 10 * 5 IU / ml. Opterećenje veće od 1 × 10 * 7 IU / ml smatra se vrlo visokim, dok je nisko opterećenje manji od 4 x 10 * 5 IU / ml.

Stupanj viralnog opterećenja sugerira virulenciju (agresivnost) virusa: što je veća količina u krvi, brže se mogu razviti komplikacije jetre. Visoka koncentracija virusa u krvi trudnice povećava vjerojatnost njegovog prodiranja kroz hemato-placentu barijeru na fetus. Viremia također utječe na učinkovitost liječenja: s niskim brojem, učinkovitost terapije je viša nego kod visokih.

Da bismo bili sigurni u točnost analize PCR-a za hepatitis C, potrebno je dati prednost samo onim laboratorijima koji su dobro radili. Politika cijena u ovom slučaju ne bi trebala igrati primarnu ulogu.


Više Članaka O Jetri

Hepatitis

Kvalitativna analiza za hepatitis C

Ostavite komentar 9.080Kvalitativna analiza lančane reakcije polimeraze - PCR za hepatitis C određuje prisutnost ili odsutnost HCV u tijelu. U laboratorijskim uvjetima proučava se struktura RNA koja će uključivati ​​virus.
Hepatitis

Bol u ispravnom hipohondrijumu

Analiza sindroma boli pokazala je da bol lokaliziran u pravom hipohondriju se u različitim vremenima osjeća u do 1/3 odrasle populacije. U 90% ljudi, patološke promjene su uzrok.